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耐甲氧西林金葡菌檢測方法比較論文(附論文PDF版下載)

發布時間:2018-09-28 11:00:55 文章來源:SCI論文網 我要評論














SCI論文(www.zzyljfls.com):
 
摘  要:目的  比較不同的耐甲氧西林金葡菌檢測方法。方法  在我院 2016 年 1 月至 2017 年 1 月的臨床感染標本中分離出金葡菌菌株 120 株作為研究對象,分別采用苯唑西林紙片擴散法、頭孢西丁紙片擴散法及 PCR 法對120 株金葡菌菌株進行檢測,并以 PCR 法的檢測結果作為黃金標準,比較不同檢測方法對耐甲氧西林金葡菌的檢測效果。結果 120 株金葡菌菌株經 PCR 法檢測發現耐甲氧西林金葡菌 71 株(59.17%),甲氧西林敏感金葡菌 49 株(40.83%)。苯唑西林紙片擴散法檢測耐甲氧西林金葡菌的靈敏度、特異度、漏診率、誤診率及 Youden 指數分別為 81.69%、77.56%、18.31%、22.45%、0.584;頭孢西丁紙片擴散法檢測耐甲氧西林金葡菌的靈敏度、特異度、漏診率、誤診率及 Youden 指數分別為 92.96%、95.92%、7.04%、4.08%、0.817;比較示頭孢西丁紙片擴散法對耐甲氧西林金葡菌的檢測效果優于苯唑西林紙片擴散法(P< 0.05)。結論 P PCR 法是檢測耐甲氧西林金葡菌的首選方法,此外頭孢西丁紙片擴散法操作方便、實驗要求低、結果較準確,也是一種較好的檢測方法。

關鍵詞: 耐甲氧西林金葡菌;苯唑西林紙片擴散法;頭孢西丁紙片擴散法;PCR 法;檢測

本文引用格式:吳強. 耐甲氧西林金葡菌檢測方法比較 [J]. 世界最新醫學信息文摘 ,2018,18(70):156+158.

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0引言

金葡菌即金黃色葡萄球菌,是一種高毒性細菌,臨床感染率較高,其主要會引起腸炎、肺炎、心包炎以及局部化膿炎癥、膿毒癥等疾病 [1]。有些金葡菌可以產生青霉素酶,表現為青霉素耐藥。甲氧西林是一種半合成青霉素,耐甲氧西林金葡菌被稱為超級細菌,目前針對耐甲氧西林金葡菌的檢測,是一項重要的臨床課題。

1資料與方法

1.1一般資料。在我院 2016 年 1 月至 2017 年 1 月的臨床感染標本中分離出金葡菌菌株 120 株作為研究對象,菌株主要來源于患者的痰液、尿液、膿液、血液、咽拭子、深靜脈置管以及壞死組織。

1.2方法。分別采用苯唑西林紙片擴散法、頭孢西丁紙片擴散法及 PCR 法對 120 株金葡菌菌株進行檢測,并以PCR 法的檢測結果作為黃金標準,比較不同檢測方法對耐甲氧西林金葡菌的檢測效果。

1.2.1苯唑西林紙片擴散法:將金葡菌菌株濃度調制 1.5×108 CFU/mL,然后將標本涂抹在 4 mm 的 MH 瓊脂平板上,在瓊脂板上貼上苯唑西林紙片,放置在 35℃環境下,孵化 24 h。若抑菌圈直徑 ≤18 mm 為耐藥,≥20 mm 為敏感。

1.2.2頭孢西丁紙片擴散法:將金葡菌菌株濃度調制 1.5×108 CFU/mL,然后將標本涂抹在 4 mm 的 MH 瓊脂平板上,在瓊脂板上貼上頭孢西丁紙片,放置在 35℃環境下,孵化 24 h。若抑菌圈直徑 ≤10 mm 為耐藥,≥13 mm 為敏感。

1.2.3PCR 法:將金葡菌菌株濃度調制 3×108 CFU/mL, 同時在 50 μL DNA 提取液中滴入 10 μL 菌懸液,嚴格按照說明書進行 PCR 操作。在 100℃溫度下水浴 15 min,以20000 r/min 的轉速進行離心處理 10 min,再取 5 μL 上清液進行擴增處理。將擴增后的液體取 10 μL 置于 2.0% 瓊脂糖 TRB 緩沖系統中進行電泳,利用紫外透射進行檢測,若發現 1000 bp 條帶則為陽性。

1.3 統計學分析。采用 SPSS 19.0 統計學軟件進行分析和統計,計量資料用均數 ± 標準差( ±s)表示,并行 t 檢驗, 計數資料采用 [n (%)] 表示,并行卡方檢驗,以 P< 0.05 為差異有統計學意義。

2結果

120 株金葡菌菌株經 PCR 法檢測發現耐甲氧西林金葡菌71 株(59.17%),甲氧西林敏感金葡菌 49 株(40.83%)。苯唑西林紙片擴散法檢測耐甲氧西林金葡菌的靈敏度、特異度、漏診率、誤診率及 Youden 指數分別為 81.69%、77.56%、18.31%、22.45%、0.584; 頭孢西丁紙片擴散法檢測耐甲氧西林金葡菌的靈敏度、特異度、漏診率、誤診率及Youden 指數分別為 92.96%、95.92%、7.04%、4.08%、0.817; 比較示頭孢西丁紙片擴散法對耐甲氧西林金葡菌的檢測效果優于苯唑西林紙片擴散法(P< 0.05),詳見表 1 和表 2。

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3討論

金葡菌又稱嗜肉菌,而耐甲氧西林金葡菌則是由金葡菌演變而來的新型耐藥型金葡菌,是一種超級細菌,具有很強的藥物抵抗性。耐甲氧西林金葡菌自身固有耐藥性,可與細菌自身生產PBP,其可在 β- 內酰胺類抗生素環境中生存[2]。其次耐甲氧西林金葡菌還具有獲得耐藥性。研究發現,耐甲氧西林金葡菌還可改變抗生素作用靶向,從而降低膜通透性, 生成修飾酶,以起到抵抗多類藥物的效果。

目前,臨床檢測耐甲氧西林金葡菌的主要方法有:PCR 法、苯唑西林紙片擴散法、頭孢西丁紙片擴散法等。其中
PCR 法的檢測結果多作為黃金標準,而紙片擴散法則相對來說操作簡單,成本低,檢測結果直觀 [3-4]。

根據本組研究結果示:120 株金葡菌菌株經 PCR 法檢測發現耐甲氧西林金葡菌 71 株(59.17%),甲氧西林敏感金葡菌 49 株(40.83%)。苯唑西林紙片擴散法檢測耐甲氧西林金葡菌的靈敏度、特異度、漏診率、誤診率及Youden 指數分別為 81.69%、77.56%、18.31%、22.45%、0.584;頭孢西丁紙片擴散法檢測耐甲氧西林金葡菌的靈敏度、特異度、漏診率、誤診率及 Youden 指數分別為 92.96%、95.92%、7.04%、4.08%、0.817[5];比較示頭孢西丁紙片擴散法對耐甲氧西林 金葡菌的檢測效果優于苯唑西林紙片擴散法(P< 0.05)??梢缘贸鼋Y論:PCR 法是檢測耐甲氧西林金葡菌的首選方法, 此外頭孢西丁紙片擴散法操作方便、實驗要求低、結果較準確, 也是一種較好的檢測方法。

參考文獻:

[1]黎文君. 耐甲氧西林金葡菌檢測方法比較 [J]. 現代儀器與醫療,2015,21(01):74-75.
[2]佟爽 , 何平.110 例老年患者耐甲氧西林金葡菌的感染現狀及耐藥性分析 [J]. 實用藥物與臨床 ,2015,18(01):79-82.
[3]閆虹 . 耐曱氧西林金黃色葡萄球菌耐藥性及其分型研究 [D]. 鄭州大學,2015.
[4]劉瀟. 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌 SCCmec 基因分型檢測與耐藥性分析[D]. 新疆醫科大學,2013.
[5]諶秋華, 范叢進. 耐甲氧西林金葡菌的頭孢西丁檢測法與耐藥性分析[J]. 中國抗生素雜志 ,2005(11):672-673+685.

《耐甲氧西林金葡菌檢測方法比較論文》附論文PDF版下載:
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